DIO細胞膜綠色熒光探針
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DiO即DiOC18(3),全稱為3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine
perchlorate,是常用的細胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料,進入細胞膜后可以側(cè)向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。
DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱,僅當進入到細胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長為484nm,大發(fā)射波長為501nm。
DiO可以溶解于無水、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.72
CAS:34215-57-1
DiO被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term
tracer)。DiO通常不會明顯影響細胞的生存力(viability)。DiO對于細胞膜染色的熒光強度通常要低于DiI,有時對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。
DiO除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence
Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
用于細胞膜熒光標記時,DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細胞或組織,染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定,使用其它不適當?shù)墓潭ㄒ簳?dǎo)致熒光背景較高。
保存條件:
4℃避光保存,一年有效。配制的儲存液-20℃避光保存,半年有效。
注意事項:
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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